Ploskireva médium (Bacto-agar F): popis. lékařská mikrobiologie

Ploskireva médium (dále jen ještě Bacto agaru F) je živné médium pro kultivaci určitých mikroorganismů, především Shigella a Salmonella. Jako zdroj pro své materiály infikovaných Využití: moč, žluč, výkaly.

příběh

Nikolaj Ivanovič Ploskirev - Sovětský mikrobiolog a ctěná lékař. Narodil se v roce 1869 a zemřel v roce 1948 poté, co pracoval většinu svého života ve svém rodném městě - Tomsk.

V roce 1888, on, budoucí vědce, aniž by dokončil šestý stupeň školy, vstoupil do armády. byl schopen dokončit výcvik pouze v roce 1892, poté složil zkoušky pro přijetí do Imperial Tomsk univerzitě studoval na lékařské fakultě. V roce 1898 získal titul doktora.

Ploskirev účastnil rusko-japonské války, a poté, co pracoval v nemocnici Tomsk. V roce 1910 byl jmenován do funkce vedoucího Tomsk dermatologického a pohlavní nemocnici a po dobu třiceti let byla jeho stálá hlava. Stejný vědec byl jedním ze zakladatelů STI kliniky v Tomsku.

Nikolaj Ivanovič Ploskirev napsal řadu děl věnovaných boji proti pohlavními chorobami.

struktura

Středa Ploskireva - materiál pro pěstování střevních bakterií, a proto musí obsahovat několik druhů živin. Vyrábí se v suché formě.

Poměrně velká část jeho celkové hmotnosti je pankreatický hydrolyzát šprot (10,4 g / l). O něco méně představovaly hydrocitrate hydrogenfosforečnanu sodného (8,5 g / l). Také tam je suchý živné půdy a mléčný cukr (8,62 a 7,3 g / l).

Druhý titul Ploskireva médium - J. Bacto-agar v prostředku je přítomen v množství od agaru, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo bezvodý obsah sodíku se rovná 5,1 g / l. Tam je přítomnost bezvodého hydrogenfosforečnanu sodného - 2,1 g / l, sodné soli kyseliny cholové asi 3,46 g / l a soda - 2,4 g

Méně než gram v nich obsažené ukazatele - neutrální červeň (0,05) a brilantní zeleně (0,0002). Obsah jódu - 0,13.

přihláška

Studium biochemických procesů bakterií hraje velmi důležitou roli v diagnostice chorob, které způsobují anaerobní organismy. Druhy v této rodině - stovky. Jsou v morfologii a kulturních vlastností, a nejspolehlivější způsob, jak odlišit od sebe téměř totožné - je studium biochemie.

Studie začíná inokulací patologického materiálu do kultivačního média. Ona patologický rozdíl pro koliformních bakterií a jeho součástí, kromě prostého agaru, zahrnuje světlo a laktózu. Zpracování schopnost laktózy - důležitým znakem diferenciaci enterobakterií. Je-li toto objeveno, hodnota pH se posune směrem k kyselosti a je aktivován ukazatel, který změní kolonii.

Ostatní země mohou používat jiné živné půdě, ale jejich mechanismus účinku odpovídá tři nejběžnější v Rusku - toto prostředí Endo a Levine Ploskireva středu.

Popis metody

V zahraničí Ploskireva analog médium je tzv MacConkey agar. V konečné podobě transparentního roztoku, má světle růžové-žluté barvy. Kolonie schopné zpracovat laktózu, mezi Ploskireva získá červená (brusinková) barvu. V případě, že bakterie nemůže zpracovat ji, nebo kolonie je bezbarvý nebo má slabý barvu.

Vzhledem k tomu, že složení média zahrnuje látky Ploskireva inhibitory (brilantní zeleň, žlučové soli, jód), to je téměř zcela inhibuje růst gram-pozitivních flóry, stejně jako v první den eshehiry významně zpomaluje růst, jakož i další obvyklé současně mikroflóru.

druhá noha

Další zájem je výběr kolonie, a to se naočkuje na primární paměťové médium a diferenciace. Prostředí, ve kterém je setí by měl obsahovat více substrátů. Bakteriální kultura by měl detekovat enzymatickou aktivitu ve vztahu k nim, na stejné médium umístěné v trubkách tak, že existují dvě místa:

• taková, ve které šikmé agar;
• s kolonou.

Zájem badatelů v osadě obydlených zkosená část hustého mrtvice a ve sloupci - blbec. V této fázi se médium Russell, Kligler nebo Olkenitskogo. Jako diferenciální diagnostiku a použité Ploskireva středu.

Mikrobiologie a patogenní organismy

Agar Ploskireva je důležitým faktorem při detekci infekcí způsobených bakterií čeledi Enterobacteriaceae. Tak například se pěstuje a diferencované kolonie mikroorganismů, které způsobují bacilární úplavici. Tato anaerobní organismy, které patří do rodu Schigella.

Tak jako každý, kdo je součástí skupiny střevních bakterií, Shigella mají tvar tyčí, o velikosti dvou mikrometrů. Nepředstavují tobolky a spory mají bičíky - umožňuje, aby byly odlišeny od Salmonella, který, podle pořadí, jsou mobilní telefony. Rostou dobře na většině jednoduchých médiu, při teplotě mírně nad teplotou okolí (35-37 ° C) a 7,4 pH. Podle charakteru růstu, kolonie neliší od Salmonella.

Jak bylo uvedeno výše, mohou být v podstatě mikroorganismy morfologické rozdíly se však značně liší v biochemických procesů života. Tak, s výjimkou Shigella Nyukestl, bez tvorby kyselého plynu dochází v průběhu fermentace sacharidů. S výjimkou Shigella sonnei, nemohou kvasit laktózu, ale se štěpí glukózu. Jen proto, aby jejich klíčových funkcí, můžete nosit, co mohou snížit niraty na dusitan. Jejich kolonie byly štěpeny s močovinou, jakož i v kultivačním médiu není zkapalnění želatiny.

Sběr a zpracování osiva

Pro detekci činidel úplavice, jsou zapotřebí mikrobiologické testy zamořené prostředí, tj stolice pacienta. Po obdržení materiálu, je třeba co nejrychleji udělat setí. Pokud to není možné, musí být zdroj umístěn do konzervační činidlo - fosfátové pufrové směsi nebo glycerol. Při 4 ° C, mohou být skladovány po dobu delší než jeden den. Sbírat materiál musí být provedena pomocí rektální skleněné trubice, která je vložena do konečníku.

Pro studie z materiálu vybraného hnisavý hlenu částí, které mají prát v dvou až tří trubek izotonickém roztoku chloridu sodného.

Aplikace patogenních bakterií v prostředí Ploskireva udělal skleněnou špachtlí. Je třeba třít na malou část svého agaru, pak odtrhnout špachtle na životní prostředí, a zbylý materiál se vtírá do osevní plochy. Je-li očkování provedeno v několika šálky, pak se ke každému z nich je třeba založit novou dávku.

Pokud se při přijímání na vyhrazeném analýzy muko-hnisavé kusů, neznamená to, že neexistuje žádná přítomnost patogenů. V takovém případě je nutné, aby emulgovat výkaly ve 10 ml roztoku chloridu sodného (koncentrace 0,85%) a pak zasít jednu nebo dvě kapky na médiu Ploskireva. Neemulgovaný židle mohou být zaseta do selenitovy vývaru. On také používá, je-li místo na výkaly jsou zvratky či výplachy.

mikrobiologická diagnostika

V první fázi mikrobiologických studií provedených setí patogenních bakterií ve dvou šálků, pak se dívat, jak pěstovat Shigella. Ve středu Ploskireva produkoval plodiny, a druhý - na životní prostředí nebo Endo Levin.

Vzhledem k tomu, že existují kmeny Shigella jsou rezistentní na antibiotika, aby bylo médium doplněno s chloramfenikolem. Pak nastane v dnech inkubace v inkubátoru při teplotě 37 ° C

Na druhý den, aby prozkoumala pěstované kolonie. Ty, které nejsou na diagnostickém médiu diferenciální pěstované bezbarvý, je nutné vyřadit Russellův střední nebo krátké „nesourodou řádek.“ Další výzkum je prováděn pomocí algoritmu podle hlavních plodin na ně. Kolonie Shigella ve středu Ploskireva rostou v podobě průhledné, bezbarvé a malých kolonách. Jsou dva typy:

• zploštělé se zubatými okraji;
• zaoblený, konvexní, s typickou mokré lesk.

Tři nebo čtyři kolonie musí být mikroskopirovat a vyšetřují na mobilitu. Pokud tento neukáže, že přemístil ve středu Olkenitskogo izolovat čisté kultury. V nepřítomnosti charakteristické kolonie Shigella nebo, je-li žádný růst pozorována vůbec, je nutné Endo agaru nebo Ploskireva potravinářský setí selenitovogo vývaru. Jsou-li přítomny v dostatečném počtu typické kolonie, dal odhadovanou aglutinaci. Směs sera sonnei a Flexner, reakce probíhá na sklo.

další výzkum

Třetího dne dochází ke změnám, ke kterým došlo v koloniích na médiu Russella. Je-li kultura, která nezhoršuje laktózy a glukózy fermentuje za vzniku kyseliny, se oddělí a analyzují, stráví mikroskopie, jakož i provádět setí v „pestré řadě,“ ale tentokrát rozšířen. Stačí dát aglutinační reakce, aby se sérologickou identifikací.

V poslední den, může být uzavřena na základě změn v „nesourodým číslo“ (v případě, že se fermentace sacharidů), jakož i shrnuje aglutinační reakci.

Skladování a příprava

Příprava agaru Ploskireva probíhá následujícím způsobem:

1. 55 g suché látky se míchá v litru destilované vody.
2. Se vaří po dobu dvou až tří minut, dokud se agar ještě není zcela roztaven.
3. Se vylije do Petriho misek (sterility volitelné) vrstvy 5-6 mm.
4. Desky jsou ponechány otevřené na půl hodiny při teplotě místnosti (18-25 °). Po této době se medium je dostatečně ztvrdnout a suché.

Středa Ploskireva fotosenzitivní a hygroskopické. Prášek by měl být uložen v uzavřeném obalu, relativní vlhkost vzduchu v místnosti nesmí být vyšší než 60%. Optimální teplota pro skladování 2 ° C až 25 ° C Skladování musí být v souladu s těmito pravidly, jinak je možné nepřesné výsledky.