Mikrobiologické metody studia vody, půdy a vzduchu

Mikroorganismy - malé, většinou jednobuněčné bytosti, které jsou rozšířené v přírodě. Vyskytují se ve všech médiích (vzduch, půda, voda) u lidí a zvířat, v rostlinách.

Kvalitativní různorodost a počet organismů závisí především na nutričních látek. Ale je také důležité, protože vlhkost, teplotu, větrání a působením slunečního záření a dalších faktorech.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Metody pro hygienické a mikrobiologické studie přírodní médium může detekovat přítomnost patogenů a určit jejich množství v souladu se získanými výsledky, rozvíjet opatření k odstranění nebo prevenci infekčních chorob. Kromě toho kvantitativní účtu je zapotřebí pro modelování ekosystémů a rozvoje přírodních procesů správy. . Pojďme dále zvážit, jaké jsou metody mikrobiologického vyšetření.

půda

To je považováno učenci jako jeden z možných cest přenosu infekčních chorob. S sekret lidského nebo zvířecího pacienta, který proniká půdních patogenů. Některé z nich, zejména spor, může přetrvávat v půdě po dlouhou dobu (někdy po celá desetiletí). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Půdní pádu patogenů jako nebezpečné infekce, jako je tetanu, antrax, botulismus, a tak dále. Metody zdravotnické mikrobiologické studie půdy umožňují definovat „mikrobiální počet“ (počet mikroorganismů v půdě gramu), a coli index (počet E. coli) ,

Analýza půdy: přehled

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Metody pro mikrobiologické vyšetření půdy je třeba v první řadě připsat přímé mikroskopie a kultury na pevném živném médiu. Populace mikroorganismů a jejich skupin, které obývají půdu, se liší na taxonomické zařazení a ekologických funkcí. Ve vědě, jsou sjednoceny pod obecným pojmem „půdní bioty.“ Primer - stanoviště obrovské množství mikroorganismů. V gram půdy je přítomno 1 až 10 miliard svých buňkách. V tomto prostředí se aktivně rozklad organických látek, za účasti různých saprofytickými mikroorganismů.

Mikroskopické studie mikrobiologické metody: kroky

Analýza média začíná odběrem vzorků. Pro tento účel předem oloupané a strouhaným alkohol nůž (lopata lze použít). Po tom, příprava vzorku. V dalším kroku - počet buněk, označených šmouhy. Zvážit každý krok zvlášť.

vzorkování

Při analýze zemědělských půd tendenci odebrán vzorek z hloubky celé vrstvy. První odstraní 2-3 cm nad zemí, jak to může být přítomen v cizí mikroflóry. Poté, s rozlohou půdy studoval vzít monolitů. Délka každého z nich musí být v souladu s tloušťkou vrstvy, ze kterého chcete ochutnat.

Na pozemku o 100-200 čtverečních. 7-10 m vybrané vzorky. Hmotnost každého - v řádu 0,5 kg. Tyto vzorky musí důkladně promíchat, v kapse. Pak se průměrný vzorek o hmotnosti přibližně 1 kg. To by mělo být umístěno na pergamenu (sterilní) obalu uzavřený v povlacích. Před přímou analýzu vzorku uloženého v chladničce.

Příprava průzkum

Míchaná půdy nalije na suchém skle. Jeho pre-otřít alkoholem a spálit nad hořákem. Špachtlí půdu důkladně promíchat a rozšířit rovnoměrně. Je nutné, aby se odstranily kořeny a jiné cizí prvky. Chcete-li to provést, použijte pinzetu. Před uvedením do provozu pinzety a špachtle nad hořákem zapálí a nechá se ochladit.

Z různých půdních ploch rozdělených na sklo, vybrané malé porce. Jsou zváženy v porcelánové misce na technickém měřítku. является специальная обработка образца. Povinné krok mikroskopické Způsob mikrobiologické studie je zvláštní zpracování vzorku. 2 musí být předem připraven, sterilní baňky. Jejich velikost by měla být větší než 250 ml. Jedna z baněk se nalije do 100 ml vody z kohoutku. Vzhledem k tomu, že se 0,4-0,8 ml kapalného vzorku půdy a zvlhčí na pastu. Směs by měla být tření s prstem nebo gumovou paličkou po dobu 5 minut.

Voda z první baňky byl převeden do půdy masové prázdné nádoby. Dále, třela si záda. Poté, co tato hmota se přenese do baňky v blízkosti plamen hořáku. Nádoba se suspenzí půdy byla třepána na třepačce po dobu 5 minut. Potom se nechá usadit po dobu asi 30 sekund. To je nezbytné, aby velké částice usadit. Po půl minuty hmota se použije pro přípravu přípravku.

Počty buněk na fixovaných skvrn

, разработанному Виноградским. Přímá mikroskopická studie půdy se provádí metodou mikrobiologické studie, vyvinutý Vinogradskii. V určitý objem suspenze se počítá počet buněk mikroorganismů. Studovat fixovaných skvrn lze uložit léky dlouhodobě a provádět výpočty kdykoliv.

Příprava léku následovně. Určité množství kalu (typicky 0.02-0.05 ml) se nanáší pomocí mikropipety na snímku. K tomuto roztoku se přidá kapka agar-agar (polysacharid agaropektinu směsi a agarosa se extrahuje z hnědé a červené řasy Černého moře), míchá se rychle a chová více než 4-6 čtverečních. cm. Pap suší na vzduchu a pevné po dobu 20-30 minut. alkohol (96%). Dále je léčivo navlhčí destilovanou vodou a umístí se na p-p karbolová Erythrosin 20-30 min.

Po obarvení se promyje a vysuší na vzduchu. Počítání buněk provádí z ponorného objektivu.

Setí na pevném médiu

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Mikroskopické metody pro mikrobiologické vyšetření může detekovat velký počet mikroorganismů. Ale i přes to, metoda očkování je nejčastější v praxi. Jeho podstata spočívá v tom, setí množství (suspenze půdy) léčiva v Petriho misce na pevném médiu.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Tento způsob mikrobiologického výzkumu bere v úvahu nejen množství, ale i skupiny a v některých případech, a druhové složení mikroskopických flóry. Počítání počtu kolonií vyrobených, obvykle ze dna Petriho misky v procházejícím světle. Na vypočtené oblasti umístěn marker nebo inkoustové kapky.

Analýza vody

Mikroflóra vodním útvaru, zpravidla odráží mikrobiální složení půdy kolem něj. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. V této souvislosti se způsoby sanitární-mikrobiologickou analýzu vody a půdy jsou zejména praktický význam při studiu stavu konkrétního ekosystému. Čerstvá voda obsahuje, jako pravidlo, koky, tyčinkovitých bakterií.

Anaerobní bakterie ve vodě našel v malém množství. Zpravidla se množí na dně vodních ploch, v bahně, které se účastní procesu čištění. Mikroflóra oceány a moře s výhodou zastoupeny HALOFYTNÍ (halofilní) bakterie.

Ve vodě, artéských studní prakticky žádné mikroorganismy. To je vzhledem k filtrační kapacity vrstvy zeminy.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Konvenční metody mikrobiologického výzkumu vody považuje za definici mikrobiální a coli titru nebo if-index. První ukazatel definuje počet bakterií v 1 ml kapaliny. Coli index představuje počet koliformních bakterií přítomných v litru vody, a v případě, titru - minimální počet nebo maximální ředění kapaliny, ve které se mohou stále ještě být detekována.

Stanovení mikrobiálního počtu

Tato metoda sanitární mikrobiologické vyšetření vody je následující. V 1 ml vody se stanoví počet mezofilních a fakultativně anaerobní (mezilehlých) aerobní schopen na maso peptonem agaru (primární médium) při teplotě 37 ° C. během dne tvořit kolonie viditelné při zvětšení 2-5 str. nebo pouhým okem.

является посев. Klíčový krok způsobu mikrobiologickou analýzu vody je zaseto. Vzhledem k tomu, každý vzorek se vysévají alespoň 2 různých objemů. Když je analýza vodovodní voda v každém pohárku z 1-0,1 ml čisté kapaliny a kontaminované 0.01-0.001 ml. Pro inokulaci 0,1 ml nebo menšího objemu tekutiny se zředí destilovanou (sterilní) vody. Soustavně připravovat desetinná ředění. 1 ml každého z nich je vyroben ve dvou Petriho miskách.

Chov naplněné živném agaru. Nejprve musí tát, a ochladí se na 45 ° C. Po míchání se aktivní prostředí se nechá na vodorovné ploše pro tuhnutí. Při teplotě 37 °. plodiny pěstují po celý den. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Uvažovaný způsob mikrobiologického výzkumu vody bere v úvahu výsledky těchto pokrmů, kde se počet kolonií v rozsahu 30 až 300 mm.

ovzduší

To je považováno za tranzit půdou pro mikroorganismy. являются седиментация (оседание) и аспирация. Hlavní metody mikrobiologických studií jsou vzduch sedimentaci (usazování) a aspirace.

vzduch prostředí mikroflóra je libovolně rozdělena do proměnné a konstantní. Do první skupiny patří kvasinky, chromogenní koky, spór nesoucí bacillus coli a další mikroorganismy, které jsou rezistentní k sušení, vystavení světlu. Zástupci variabilní mikroflóry, pronikající do ovzduší z jejich obvyklém prostředí, dlouho udrží svou vitalitu.

V ovzduší velkých měst mikroorganismů mnohem více než ve vzduchu prostředí venkovských oblastí. Nad mořem, lesy jsou velmi málo bakterií. čištění vzduchu usnadnit srážení: sníh a déšť. Hala mikroby mnohem více než na otevřených prostranstvích. Jejich počet se zvýšil v zimě při absenci pravidelného větrání.

sedimentace

считается простейшим. Tento způsob mikrobiologického výzkumu v oblasti mikrobiologie je považována za nejjednodušší. Je založen na usazování kapiček a částic na povrch agaru v otevřené Petriho misce pod gravitace. sedimentační metodou se nemusí přesně určit počet bakterií ve vzduchu. Faktem je, že v otevřeném kelímku chytit frakce jemných prachových částic a kapének bakteriální dost obtížné. Na povrchu zachována hlavně velké částice.

Tato metoda není používán pro analýzu vzduchu. Toto prostředí vyznačuje velkými výkyvy v rychlosti proudění vzduchu. Sedimentační však mohou být použity v nepřítomnosti sofistikovanějších zařízení nebo zdroje elektrické energie.

Stanovení počtu mikrobiálních provedeného metodou Omelyansky. V souladu s nimi, po dobu 5 minut na ploše 100 čtverečních agaru. cm usadí řada bakterií je přítomna v množství 10 litrů vzduchu.

Objednat 535 „Na sjednocení mikrobiologických metod vyšetřování“

Bakteriologická analýza zaujímá důležité místo v komplexních klinických a laboratorních činností zaměřených na diagnostiku, prevenci a léčbě různých infekčních chorob. Nicméně, studie o životním prostředí, nejsou omezeny.

Zvláště důležité je bakteriologická analýza biologického materiálu v nemocnicích. Výzkumu prováděného ve zdravotnických zařízeních, zvýšené nároky. Účelem vyhlášky „o sjednocení mikrobiologických metod vyšetřování“ je zlepšit bakteriologickou analýzu, zlepšení kvality a účinnosti mikrobiologické diagnostiky.

Mikroskopické vyšetření stěrů u žen

Je to klíčový metoda analýzy pro diagnostiku infekcí, pohlavně přenosných nemocí a oportunní infekce (oportunní bakterie).

Mikroskopická analýza pro hodnocení kvalitativní a kvantitativní složení mikroflóry, zkontrolovat správnost odběru vzorků. Například přítomnost vaginálního epitelu v výtěrů z cervikálního kanálu indikuje porušení pravidel výběru biologického vzorku.

Říká se, že mikrobiologické vyšetření v tomto případě je obvykle následuje některé problémy. Jsou souvisí s tím, že v dolní genitálního traktu se běžně vyskytuje pestrou mikroflóru, která se mění v různém věku. Ke zlepšení efektivity výzkumu a vyvinuli standardizovaných pravidel.

Diagnóza virové infekce

To se provádí způsoby, které jsou pro detekci RNA a DNA patogenů. Jsou založeny především na stanovení nukleotidových sekvencí v patologickém materiálu. Pro tento účel, molekulární sondy. Jsou uměle nukleové kyseliny komplementární k (komplementární) virové kyseliny značené radioaktivní značkou nebo biotin.

Zvláštnost způsobu se opakuje kopírování specifického DNA fragmentu obsahujícího několik stovek (nebo desítky) nukleotidových párů. replikace (kopírování), je to, že rozšíření může spustit pouze v určitých jednotkách. primery (primery) použitý k jejich vytvoření. Jsou syntetizovány oligonukleotidy.

PCR diagnostika (polymerázová řetězová reakce) je jednoduché provedení. Tato metoda vám umožní rychle získat výsledek pomocí malého množství patologického materiálu. Pomocí PCR diagnostiku označuje akutní, chronické a latentní (skryté) infekcí.

Když je Citlivost této metody je považována za výhodnější. Nicméně současné testovací systémy nejsou dostatečně spolehlivé, takže diagnóza PCR nemůže zcela nahradit tradiční metody.